interlökin 6 - Interleukin 6

IL6
IL6 Kristal Yapı.rsh.png
Mevcut yapılar
PDB Ortologtur arama: PDBe RCSB
tanımlayıcılar
takma adlar IL6 , BSF2, HGF, HSF, IFNB2, IL-6, BSF-2, CDF, IFN-beta-2, interlökin 6
Harici kimlikler OMIM : 147620 MGI : 96559 HomoloGene : 502 GeneCards : IL6
ortologlar
Türler İnsan Fare
Entrika
Topluluk
UniProt
RefSeq (mRNA)

NM_000600
NM_001318095
NM_001371096

NM_031168
NM_001314054

RefSeq (protein)

NP_000591
NP_001305024
NP_001358025

NP_001300983
NP_112445

Konum (UCSC) Chr 7: 22.73 – 22.73 Mb Chr 5: 30.01 – 30.02 Mb
PubMed'de arama
Vikiveri
İnsan Görüntüle/Düzenle Fareyi Görüntüle/Düzenle

İnterlökin 6 ( IL-6 ), hem pro-inflamatuar sitokin hem de anti-inflamatuar miyokin olarak işlev gören bir interlökindir . İnsanlarda IL6 geni tarafından kodlanır .

Ek olarak, osteoblastlar , osteoklast oluşumunu uyarmak için IL-6 salgılar . Düz kas hücreleri içinde ve tunika medya birçok kan damarlarının de bir pro-enflamatuar olarak, IL-6 üretimi sitokin . IL-6'nın bir anti-inflamatuar miyokin olarak rolüne, TNF-alfa ve IL-1 üzerindeki inhibitör etkileri ve IL-1ra ve IL-10 aktivasyonu aracılık eder .

IL-6'nın daha geniş koronavirüs pandemisi bağlamında kötü prognozlu şiddetli COVID-19 enfeksiyonu için inflamatuar bir belirteç olarak kullanılabileceğine dair bazı erken kanıtlar vardır .

İşlev

Bağışıklık sistemi

IL-6, patojenle ilişkili moleküler modeller ( PAMP'ler ) olarak adlandırılan spesifik mikrobiyal moleküllere yanıt olarak makrofajlar tarafından salgılanır . Bu PAMP'ler , Toll benzeri reseptörler ( TLR'ler ) dahil olmak üzere, model tanıma reseptörleri (PRR'ler) olarak adlandırılan , doğuştan gelen bağışıklık sisteminin önemli bir tespit molekülü grubuna bağlanır . Bunlar hücre yüzeyinde ve hücre içi bölmelerde bulunur ve enflamatuar sitokin üretimine yol açan hücre içi sinyalleşme basamaklarını indükler. IL-6, ateşin ve akut faz yanıtının önemli bir aracısıdır .

IL-6, akut faz protein sentezini uyarmaktan ve ayrıca kemik iliğinde nötrofil üretiminden sorumludur . B hücrelerinin büyümesini destekler ve düzenleyici T hücrelerine karşı antagonisttir .

Metabolik

Bu geçebilmekle birlikte , kan-beyin bariyerini ve sentezini başlatıcı PGE 2 içinde hipotalamus ve böylece vücudun sıcaklık ayar noktasının değiştirilmesi. Kas ve yağ dokusunda IL-6, artan vücut ısısına yol açan enerji mobilizasyonunu uyarır. 4°C'de, hem oksijen tüketimi hem de çekirdek sıcaklığı, vahşi tip farelere kıyasla IL-6-/-'de daha düşüktü, bu da IL-6-/- farelerde soğuk kaynaklı termojenezin daha düşük olduğunu gösteriyor.

İltihabın yokluğunda dolaşımdaki IL-6'nın %10-35'i yağ dokusundan gelebilir. IL-6, adipositler tarafından üretilir ve obez bireylerin daha yüksek endojen CRP seviyelerine sahip olmasının bir nedeni olduğu düşünülmektedir . IL-6 gen nakavtının olgun başlangıçlı obeziteye neden olduğu göz önüne alındığında, IL-6 olgun farelerde vücut yağının tonik bir şekilde bastırılması uygulayabilir. Ayrıca, IL-6, CNS seviyesindeki etkiler yoluyla vücut yağ kütlesini baskılayabilir. IL-6'nın kemirgenlerde antiobezite etkisi beyin seviyesinde, muhtemelen hipotalamus ve arka beyinde uygulanır.). Öte yandan, gelişmiş merkezi IL-6 trans-sinyallemesi, obezitede enerji ve glukoz homeostazını iyileştirebilir Trans-sinyalleme, reseptörün hücre dışı kısmını içeren çözünür bir IL-6R (sIL-6R) formunun IL-6'yı bağlayabildiğini gösterir. zara bağlı IL-6R ile benzer bir afiniteye sahiptir. IL-6 ve sIL-6R kompleksi, IL-6R'yi eksprese etmeyen ve IL-6'ya yanıt vermeyen hücrelerde gp130'a bağlanabilir.

Deney hayvanlarında yapılan çalışmalar, CNS'deki IL-6'nın, glukagon benzeri peptit-1 (GLP-1) reseptör stimülasyonu tarafından uygulanan gıda alımının ve vücut ağırlığının baskılanmasına kısmen aracılık ettiğini göstermektedir .

CNS dışında, IL-6'nın endokrin pankreas ve bağırsakta GLP-1 üretimini uyardığı görülüyor. Amilin , vücut ağırlığını azaltabilen ve IL-6 ile etkileşime girebilen başka bir maddedir. Ventromedial hipotalamusta (VMH) amilin kaynaklı IL-6 üretimi, amilin tedavisinin kilo kaybı üzerindeki etkisini artırmak için VMH leptin sinyali ile etkileşime girebileceği olası bir mekanizmadır.

Karaciğerdeki interlökin 6'nın , transkripsiyon faktörü STAT3'ün (mIndy promotöründeki bağlanma bölgesine bağlanan) aktivasyonu ile bağlantılı olan IL-6 reseptörüne bağlanarak insan uzun ömürlü gen mINDY ekspresyonunun homologunu aktive ettiği varsayılmaktadır. ) ve böylece sitrat alımının ve hepatik lipogenezin yükselmesi .

Merkezi sinir sistemi

İntranazal olarak uygulanan IL-6'nın, duygusal hatıraların uykuyla ilişkili konsolidasyonunu iyileştirdiği gösterilmiştir .

Beynin çeşitli bölümlerinde GLP-1 ve IL-6 arasında etkileşim belirtileri vardır. Bir örnek parabrakial çekirdekler arasında pons , GLP-1, IL-6 seviyeleri ve burada IL-6 uygulanacaktır ve belirgin bir anti-obezite etkisini arttırır.

miyokin rolü

IL-6 ayrıca , kas kasılmasına yanıt olarak yükselen, kastan üretilen bir sitokin olan bir miyokin olarak kabul edilir . Egzersizle önemli ölçüde yükselir ve dolaşımdaki diğer sitokinlerin ortaya çıkmasından önce gelir. Egzersiz sırasında, hücre dışı substratları harekete geçirmek ve/veya substrat dağıtımını artırmak için hormon benzeri bir şekilde hareket ettiği düşünülmektedir.

İnsanlarda olduğu gibi, kemirgenlerde de egzersiz sırasında çalışan kasta IL-6 ekspresyonunda ve plazma IL-6 konsantrasyonunda bir artış olduğu görülmektedir. IL-6 gen nakavtlı farelerde yapılan çalışmalar, farelerde IL-6 eksikliğinin egzersiz fonksiyonunu etkilediğini göstermektedir.

İnsan erişkinlerinde egzersizle abdominal obezitenin azaltılmasının, IL-6 reseptör bloke edici antikor tocilizumab tarafından tersine çevrilebileceği gösterilmiştir . IL-6'nın obeziteyi önlediği, lipolizi uyardığı ve egzersiz sırasında iskelet kasından salındığı bulguları ile birlikte tocilizumab bulgusu, viseral yağ dokusu kütlesini azaltmak için egzersiz için IL-6'nın gerekli olduğunu göstermektedir. Kas kaynaklı interlökin 6'nın osteoblastlarda sinyal vererek egzersiz kapasitesini arttırdığı rapor edildiğinden, kemik egzersize bağlı IL-6'dan etkilenen başka bir organ olabilir.

IL-6, bir miyokin rolünde kapsamlı anti-inflamatuar fonksiyonlara sahiptir . IL-6, kas kasılmalarına yanıt olarak kan dolaşımına salgılandığı bulunan ilk miyokindi. Aerobik egzersiz, örneğin IL-6, IL-1 reseptör antagonisti (IL-1ra) ve IL-10 dahil olmak üzere sistemik bir sitokin tepkisini tetikler. IL-6, egzersizin uzunluğu ve egzersize katılan kas kütlesi miktarı ile orantılı olarak üstel bir şekilde arttığı gözleminden dolayı tesadüfen bir miyokin olarak keşfedildi. Kas egzersizi sırasında IL-6'nın plazma konsantrasyonunun arttığı tutarlı bir şekilde gösterilmiştir. Bu artışı, IL-1ra ve anti-inflamatuar sitokin IL-10'un ortaya çıkışı takip eder. Genel olarak, egzersize ve sepsise sitokin yanıtı TNF-α'ya göre farklılık gösterir. Bu nedenle, egzersize sitokin yanıtı, plazma-TNF-α'daki bir artıştan önce gelmez. Egzersizi takiben bazal plazma IL-6 konsantrasyonu 100 kata kadar artabilir, ancak daha az dramatik artışlar daha sıktır. Plazma IL-6'nın egzersize bağlı artışı üstel bir şekilde meydana gelir ve egzersizin sonunda veya kısa bir süre sonra en yüksek IL-6 seviyesine ulaşılır. Plazma IL-6'nın egzersize bağlı artışının büyüklüğünü belirleyen, egzersizin modu, yoğunluğu ve süresinin birleşimidir.

IL-6 daha önce bir proinflamatuar sitokin olarak sınıflandırılmıştı. Bu nedenle, ilk önce egzersize bağlı IL-6 yanıtının kas hasarı ile ilişkili olduğu düşünüldü. Bununla birlikte, eksantrik egzersizin , eşmerkezli "zarar vermeyen" kas kasılmalarını içeren egzersizden daha büyük bir plazma IL-6 artışı ile ilişkili olmadığı ortaya çıkmıştır . Bu bulgu, egzersiz sırasında plazma IL-6'da bir artışı tetiklemek için kas hasarının gerekli olmadığını açıkça göstermektedir. Aslında, eksantrik egzersiz, iyileşme sırasında gecikmiş bir zirveye ve plazma IL-6'nın çok daha yavaş azalmasına neden olabilir.

Son çalışmalar, IL-6 için hem yukarı hem de aşağı sinyal yollarının miyositler ve makrofajlar arasında önemli ölçüde farklılık gösterdiğini göstermiştir. NFκB sinyal yolunun aktivasyonuna bağlı olan makrofajlardaki IL-6 sinyallemesinden farklı olarak, kas içi IL-6 ekspresyonunun Ca2+/NFAT ve glikojen/p38 MAPK yollarını içeren bir sinyalleşme kaskadları ağı tarafından düzenlendiği görülmektedir. Bu nedenle, IL-6 monositlerde veya makrofajlarda sinyal verdiğinde, bir proinflamatuar yanıt oluştururken, kastaki IL-6 aktivasyonu ve sinyalizasyonu, önceki bir TNF yanıtı veya NFκB aktivasyonundan tamamen bağımsızdır ve anti-inflamatuardır.

IL-6, artan sayıda yakın zamanda tanımlanmış diğer miyokinler arasında, bu nedenle, miyokin araştırmalarında önemli bir konu olmaya devam etmektedir. Belirtildiği gibi, egzersiz sırasında kas dokusunda ve dolaşımda bazal oranların yüz katına kadar çıkan seviyelerde ortaya çıkar ve fiziksel egzersize yanıt olarak yükseldiğinde sağlık ve vücut işleyişi üzerinde faydalı bir etkiye sahip olduğu görülür .

alıcı

Bir hücre yüzeyi yoluyla IL-6 sinyal tip I sitokin reseptör kompleksi ligand bağlama IL-6Rα zincir (oluşan CD126 ) ve bir sinyal üretir bileşen gp130 (aynı zamanda CD130 olarak adlandırılır). CD130, lösemi inhibitör faktör (LIF), siliyer nörotropik faktör , onkostatin M , IL-11 ve kardiyotrofin-1 dahil olmak üzere birçok sitokin için ortak sinyal dönüştürücüdür ve çoğu dokuda hemen hemen her yerde eksprese edilir. Buna karşılık, CD126'nın ifadesi belirli dokularla sınırlıdır. IL-6, reseptörü ile etkileşime girdiğinde, bir kompleks oluşturmak için gp130 ve IL-6R proteinlerini tetikler, böylece reseptörü aktive eder. Bu kompleksler, bir araya getirmek , hücre içi belirli aracılığıyla bir sinyal transdüksiyon akışı başlatmak için gp130'un bölgeler transkripsiyon faktörleri , Janus kinazlar (JAK) ve sinyal dönüştürücülerini ve transkripsiyon (aktifleştiriciler STAT ).

IL-6, muhtemelen en iyi çalışılmış olan sitokinlerin kullanımı bu gp130 , IL-6 sinyal dönüştürücü (IL6ST) olarak bilinen, kendi sinyal komplekslerinde. gp130 içeren reseptörler aracılığıyla sinyal veren diğer sitokinler, İnterlökin 11 (IL-11), İnterlökin 27 (IL-27), siliyer nörotrofik faktör (CNTF), kardiyotrofin-1 (CT-1), kardiyotrofin benzeri sitokin (CLC), lösemidir. inhibitör faktör (LIF), onkostatin M (OSM), Kaposi sarkomu ile ilişkili herpes virüsü interlökin 6 benzeri protein ( KSHV-IL6 ). Bu sitokinler, yaygın olarak sitokinleri kullanan IL-6 benzeri veya gp130 olarak adlandırılır.

Membran bağlı reseptöre ek olarak, IL-6R'nin çözünür bir formu (sIL-6R) insan serumu ve idrarından saflaştırılmıştır. Birçok nöronal hücre, tek başına IL-6 tarafından uyarılmaya yanıt vermez, ancak nöronal hücrelerin farklılaşması ve hayatta kalmasına sIL-6R'nin etkisi aracılık edebilir. sIL-6R/IL-6 kompleksi, nöritlerin büyümesini uyarabilir ve nöronların hayatta kalmasını teşvik edebilir ve bu nedenle, remiyelinizasyon yoluyla sinir rejenerasyonunda önemli olabilir.

Etkileşimler

İnterlökin-6'nın interlökin-6 reseptörü , glikoprotein 130 ve Galektin-3 ile etkileşime girdiği gösterilmiştir .

Nörokinin tip 1 reseptörü (NK1R, immünomodülatör aktivitenin bir aracısı) için doğal ligand olan Substance P (SP) ve IL-6 arasında önemli ölçüde fonksiyonel örtüşme ve etkileşim vardır.

Hastalıktaki rolü

IL-6, multipl skleroz , nöromiyelit optika spektrum bozukluğu (NMOSD), diyabet , ateroskleroz , depresyon , Alzheimer hastalığı , sistemik lupus eritematozus , multipl miyelom , prostat kanseri , Behçet hastalığı , romatoid gibi birçok hastalıkta inflamatuar ve oto-immün süreçleri uyarır. artrit ve intraserebral kanama.

Bu nedenle, bu hastalıkların çoğuna karşı tedavi olarak anti-IL-6 ajanlarının geliştirilmesine ilgi vardır . Bunlardan ilki , romatoid artrit , Castleman hastalığı ve sistemik jüvenil idiyopatik artrit için onaylanmış olan tocilizumab'dır . Diğerleri klinik deneylerde.

Romatizmal eklem iltihabı

İlk FDA onaylı anti-IL-6 tedavisi, romatoid artrit içindi.

Yengeç Burcu

Anti-IL-6 tedavisi başlangıçta otoimmün hastalıkların tedavisi için geliştirildi , ancak IL-6'nın kronik inflamasyondaki rolü nedeniyle kanser tedavisi için IL-6 blokajı da değerlendirildi. IL-6'nın tümör mikroçevre düzenlemesinde, meme kanseri kök hücre benzeri hücrelerin üretiminde , E-kadherinin aşağı regülasyonu yoluyla metastazda ve ağız kanserinde DNA metilasyonunun değiştirilmesinde rolleri olduğu görüldü .

İleri/ metastatik kanser hastalarının kanlarında daha yüksek IL-6 seviyeleri vardır. Bunun bir örneği, zayıf sağkalım oranları ile ilişkili olan hastalarda IL-6'nın belirgin bir şekilde yükseldiği pankreas kanseridir .

Hastalıklar

enterovirüs 71

Yüksek IL-6 seviyeleri, Enterovirus 71 ile enfekte olmuş çocuklarda ve immün yetmezlikli fare modellerinde ensefalit gelişimi ile ilişkilidir ; Bu oldukça bulaşıcı virüs normalde El, ayak ve ağız hastalığı adı verilen daha hafif bir hastalığa neden olur , ancak bazı durumlarda yaşamı tehdit eden ensefalite neden olabilir. IL-6'da belirli bir gen polimorfizmi olan EV71 hastaları da ensefalit geliştirmeye daha yatkın görünmektedir.

epigenetik modifikasyonlar

IL-6'nın beyindeki epigenetik modifikasyon üzerindeki etkisiyle çeşitli nörolojik hastalıklara yol açtığı gösterilmiştir . IL-6, Fosfoinositid 3-kinaz (PI3K) yolunu aktive eder ve bu yolun aşağı akış hedefi, protein kinaz B'dir (PKB) (Hodge ve diğerleri, 2007). IL-6 ile aktive olan PKB, DNA metiltransferaz-1 (DNMT1) üzerindeki nükleer lokalizasyon sinyalini fosforile edebilir . Bu fosforilasyon, DNMT1'in kopyalanabileceği çekirdeğe hareketine neden olur. DNMT1 kompleks olarak işe, DNMT3A ve DNMT3B dahil olmak üzere diğer DNMTs, acemi HDAC1 . Bu kompleks , gen promotörleri üzerindeki CpG adalarına metil grupları ekler , DNA dizisini çevreleyen kromatin yapısını baskılar ve transkripsiyonu indüklemek için transkripsiyonel makinelerin gene erişmesini engeller. Artan IL-6, bu nedenle, DNA dizilerini hipermetile edebilir ve ardından DNMT1 ekspresyonu üzerindeki etkileri yoluyla gen ekspresyonunu azaltabilir.

Şizofreni

IL-6 tarafından epigenetik modifikasyonun uyarılması, GAD67 promotörünün hipermetilasyonu ve baskılanması yoluyla şizofreni patolojisinde bir mekanizma olarak önerilmiştir . Bu hipermetilasyon potansiyel olarak şizofreni hastalarının beyinlerinde görülen azalmış GAD67 seviyelerine yol açabilir. GAD67, GABA seviyeleri ve nöral salınımlar üzerindeki etkisiyle şizofreni patolojisinde rol oynayabilir . Nöral salınımlar, inhibitör GABAerjik nöronlar eşzamanlı olarak ateşlendiğinde ve aynı anda çok sayıda hedef uyarıcı nöronun inhibisyonuna neden olarak meydana gelir ve bu da bir inhibisyon ve disinhibisyon döngüsüne yol açar. Bu nöral salınımlar şizofrenide bozulur ve bu değişiklikler şizofreninin hem pozitif hem de negatif semptomlarından sorumlu olabilir.

yaşlanma

IL-6 yaygın olarak yaşlanan hücreler tarafından salgılanan yaşlanmayla ilişkili salgı fenotipi (SASP) faktörlerinde bulunur ( yaşlanmayla birlikte artan toksik bir hücre tipi ). Kanser (yaşla birlikte artan bir hastalık) invazivliği, öncelikle SASP faktörlerinin metalloproteinaz , kemokin , IL-6 ve interlökin 8 (IL-8) eylemleriyle desteklenir . IL-6 ve IL-8 , SASP'nin en korunmuş ve sağlam özellikleridir.

Depresyon ve majör depresif bozukluk

IL-6'nın epigenetik etkileri de depresyon patolojisinde yer almıştır . IL-6'nın depresyon üzerindeki etkilerine beyinde beyin kaynaklı nörotrofik faktör (BDNF) ekspresyonunun baskılanması aracılık eder ; DNMT1, BDNF promotörünü hipermetile eder ve BDNF seviyelerini düşürür. Değiştirilmiş BDNF işlevi, muhtemelen IL-6 yukarı regülasyonunu takiben epigenetik modifikasyona bağlı olan depresyonda yer almıştır. BDNF, nöronlar üzerindeki omurga oluşumu, yoğunluğu ve morfolojisinde rol oynayan nörotrofik bir faktördür. BDNF'nin aşağı regülasyonu, bu nedenle, beyinde bağlantının azalmasına neden olabilir. Depresyon, özellikle anterior singulat korteks ve hipokampus gibi diğer birkaç limbik alan arasında değişen bağlantı ile işaretlenir . Anterior singulat korteks, beklenti ve algılanan deneyim arasındaki uyumsuzlukları tespit etmekten sorumludur. Bu nedenle, depresyonda anterior singulat korteksin değişen bağlanabilirliği, belirli deneyimlerden sonra değişen duygulara neden olarak depresif reaksiyonlara yol açabilir. Bu değişmiş bağlantıya IL-6 ve bunun BDNF'nin epigenetik düzenlemesi üzerindeki etkisi aracılık eder.

Ek klinik öncesi ve klinik veriler, Madde P [SP] ve IL-6'nın majör depresyonu teşvik etmek için uyum içinde hareket edebileceğini düşündürmektedir. Hibrit bir nörotransmitter-sitokin olan SP, BDNF ile birlikte paleo-spinotalamik devre yoluyla periferden kollaterallerle birlikte limbik sistemin kilit alanlarına iletilir. Bununla birlikte, hem IL6 hem de SP, olumsuz duygulanım ve hafıza ile ilişkili beyin bölgelerinde BDNF ekspresyonunu azaltır. SP ve IL6'nın her ikisi de kan beyin bariyerinin sıkı bağlantılarını gevşetir, öyle ki bu moleküllerle fMRI deneylerinde görülen etkiler nöronal, glial, kapiler, sinaptik, parakrin veya endokrin benzeri etkilerin iki yönlü bir karışımı olabilir. Hücresel düzeyde, SP'nin PI-3K, p42/44 ve p38 MAP kinaz yolları aracılığıyla interlökin-6 (IL-6) ekspresyonunu arttırdığı not edilir. Veriler, NF-κB'nin nükleer translokasyonunun SP ile uyarılan hücrelerde IL-6 aşırı ekspresyonunu düzenlediğini göstermektedir. Bu anahtar ilgi çekicidir, çünkü 1) bir meta-analiz majör depresif bozukluk, C-reaktif protein ve IL6 plazma konsantrasyonlarının bir ilişkisini gösterir, 2) 1998'den 2000'den fazla hastada 3 bağımsız grup tarafından çalışılan NK1R antagonistleri [beş molekül] 2013, benzersiz bir güvenlik profili ile mekanizmayı doza bağlı, tamamen etkili bir antidepresan olarak doğruladı. (bkz. Majör Depresyonda NK1RA'ların Özeti) , 3) kanserli depresif hastalarda IL6'nın plazma konsantrasyonlarının yükseldiğine dair ön gözlem ve 4) seçici NK1RA'lar, klinik öncesi olarak IL-6 sekresyonunun endojen SP stres kaynaklı artışını ortadan kaldırabilir. Bu ve diğer birçok rapor, majör depresif bozukluğu olan hastalarda, eşlik eden kronik inflamatuar temelli hastalıkları olan veya olmayan hastalarda nötralize edici bir IL-6 biyolojik veya ilaç bazlı antagonistin klinik bir çalışmasının muhtemelen garanti edildiğini göstermektedir; NK1RA'lar ve IL6 blokerlerinin kombinasyonunun majör depresyona ve muhtemelen bipolar bozukluğa yeni, potansiyel olarak biyolojik olarak işaretlenebilir bir yaklaşımı temsil edebileceğini .

IL-6 antikoru sirukumab şu anda majör depresif bozukluğa karşı klinik deneylerden geçiyor .

Astım

Obezite, şiddetli astım gelişiminde bilinen bir risk faktörüdür. Son veriler, potansiyel olarak IL-6'nın aracılık ettiği obezite ile ilişkili inflamasyonun, zayıf akciğer fonksiyonuna ve astım alevlenmeleri geliştirme riskinde artışa neden olmada rol oynadığını göstermektedir.

protein süper ailesi

Interleukin, G-CSF , IL23A ve CLCF1'i de içeren IL-6 süper ailesinin ( Pfam PF00489 ) ana üyesidir . IL6'nın viral bir versiyonu Kaposi sarkomu ile ilişkili herpes virüsünde bulunur .

Referanslar

Dış bağlantılar